简介
通过生物信息学分析,我们最终确定了let-7f及其靶基因对Wnt/β-catenin的调控在GIOP发病中具有重要意义,从而在一定程度上映证了我们最初的假说。在动物体内研究中,为了明确let-7f调控Wnt/β-catenin通路在补肾中药龟板防治GIOP中的作用,我们应用地塞米松造模后,设置了预防实验和治疗实验两部分,前者在造模的同时给予龟板干预3月,后者在造模3个月造成一定骨损害后应用龟板干预3月。研究结果发现,龟板对GC导致的骨量丢失、骨质量损害、骨生物力学下降及骨形态的改变具有显著防治效果,同时对GC诱导的AKP活性及骨转化升高或降低具有一定的逆转作用。最后,通过分子生物学的检测我们发现,龟板能逆转GC在基因层面诱导let-7f表达下调,其靶基因TNFR2上调,Wnt信号通路关键因子GSK3β上调,β-catenin下调,以及蛋白层面的TNFR2上调,p-GSK3β下调,p-β-catenin上调,最后我们通过IHC和WB检测到核转录因子Runx2蛋白表达升高及破骨因子CTSK蛋白显著上调。 在细胞研究中,我们应用龟板的提取物(PTE)干预BMSCs后,证实了其促BMSCs增殖及成骨分化。